Подготовка к ПЦР-анализу на наличие вируса папилломы человека (ВПЧ) включает в себя несколько важных шагов. За 24-48 часов до забора материала следует избежать интимной близости, использования вагинальных средств (свечей, гелей) и проведения гигиенических процедур, которые могут повлиять на точность результатов. Также рекомендуется не проводить анализ сразу после менструации, лучше подождать несколько дней.
Важно сообщить врачу о принимаемых лекарствах и наличии любых заболеваний, которые могут повлиять на результаты. Правильная подготовка к анализу повысит вероятность выявления ВПЧ и позволит врачу назначить соответствующее лечение при необходимости.
Генотипирование ВПЧ ВКР, качественное определение ДНК — 52.170
В рамках диагностики на первом этапе обследования женщин старше 30 лет это исследование используется наряду с цитологическим анализом, а также для интерпретации неясных результатов цитологического тестирования (ASCUS) в регионах с недостаточно развитыми программами скрининга шейки матки; оно также необходимо для мониторинга лечения выраженных повреждений шейки матки (ЦИН 2/3, рак in situ и инвазивный рак).
Реализуется с помощью ПЦР-исследований в режиме REAL TIME.
Биологический материал/Тип контейнера/Цвет крышки
1) Образец биоматериала: СОСКОБ ИЗ ВАГИНЫ И ШЕЙКИ МАТКИ, МАЗОК С СОКРЫТИЯ СЛИЗИСТОЙ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ УРЕТРЫ, МАЗОК С СЕКРЕТОМ ЭЯКУЛЯТА В ВЛАГАЛИЩЕ, МАЗОК С ПАТОЛОГИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННЫМИ УЧАСТКАМИ СЛИЗИСТОЙ.
Контейнер для проб: Прочее ПЦР Стерильный контейнер.
Подготовка к анализу:
Соскоб берется из эпителия влагалища и шейки матки. После установки гинекологического зеркала необходимо собирать материал с помощью зонда. Образец берут с поверхности шейки матки и из цервикального канала, со слизистой заднего свода или из патологически измененных участков, а затем переносят зонд в пробирку с транспортной средой.
Собранный материал для исследования должен содержать достаточное количество эпителиальных клеток! Зонд следует хорошо сполоснуть в транспортной среде, тщательно отжать о стенки пробирки и удалить. Пробирку нужно плотно закрыть и аккуратно подписать. Подпись должна включать: фамилию, имя, отчество пациента, номер образца и номер учреждения (информация должна соответствовать данным, указанным в направлении).
Для получения отделяемого из уретры у женщин. Перед взятием соскоба наружное отверстие уретры обрабатывается тампоном. Рабочая часть зонда вводится в уретру и используется для получения отделяемого, после чего зонд помещается в пробирку с транспортной средой. Зонд необходимо хорошо сполоснуть, отжать и удалить из пробирки. Пробирку следует плотно закрыть.
Пробирку также маркируют: Ф. И. О. пациента, номер образца, номер учреждения (данные соответствуют указанным в направительном бланке). Соскоб из уретры у мужчин. Перед этим необходимо обработать головку полового члена вокруг наружного отверстия уретры тампоном.
Зонд вводится в уретру на 2 – 4 см, в область ладьевидной ямки, несколько вращательных движений применяются для получения соскоба эпителиальных клеток, после чего зонд помещается в пробирку с транспортной средой. Зонд споласкивается, отжимается о стенки пробирки и удаляется. Пробирку плотно закрыть.
Подписывают пробирку: Ф. И. О. пациента, номер образца, номер ЛПУ (данные должны соответствовать указанным в направительном бланке).
Условия хранения и транспортировки:
До прибытия курьера образцы хранить при температуре +2°C. +8°C не более 12 часов с момента получения материала. Доставка в лабораторию осуществляется в тот же день, когда был собран биоматериал.
Примечание:
Внимание! Для оценки папилломавирусной инфекции (ВПЧ) материал должен собираться исключительно из эндо- или экзоцервикса!
Показания к анализу
Своевременное выполнение анализа является ключевым для ранней диагностики папилломавирусной инфекции, что позволяет предотвратить серьезные заболевания и их последствия.
Анализ на вирус папилломы человека следует сдавать при наличии следующих симптомов:
- кондиломы (сосочковые образования) на гениталиях, в области ануса и ротовой полости;
- папилломы и бородавки на коже;
- эрозия шейки матки;
- дисплазия (выявляется при цитологическом исследовании);
- разрастания в мочеиспускательном канале (выявляются при уретроскопии).
Людям без симптомов рекомендуется проходить анализ, если они относятся к группе риска:
- пациенты с ослабленным иммунитетом;
- ВИЧ-положительные;
- люди, часто меняющие половых партнеров.
Также стоит сдать анализ на папилломавирусную инфекцию всем женщинам старше 30 лет, независимо от наличия симптомов. Исследование нужно повторять не реже одного раза каждые три года.
Кроме того, анализ необходимо проходить людям, которые были вакцинированы от ВПЧ (для мониторинга эффективности вакцинации), а также тем, кто проходил лечение рака шейки матки или дисплазии (для оценки результатов терапии).
Подготовка к исследованию на ВПЧ
Чтобы гарантировать точность результатов, пациенту следует соблюдать некоторые рекомендации:
- в день перед обследованием не проводить спринцевания;
- воздерживаться от половых контактов на протяжении 2–3 дней;
- не мочиться за 1,5–2 часа до забора материала;
- женщинам важно следить, чтобы на момент анализа не было менструальных выделений.
Следуя этим рекомендациям, исследуемый материал будет содержать максимально возможное количество эпителиальных клеток при минимальном присутствии крови и слизи.
Группы риска
Наибольшей уязвимости подвергаются лица, которые:
- начали половую жизнь в раннем возрасте (до 16 лет);
- имеют наследственную предрасположенность к онкологическим заболеваниям;
- регулярно меняют половых партнеров;
- игнорируют методы барьерной контрацепции;
- страдают от заболеваний мочеполовой системы.
Дополнительные факторы риска включают частые беременности, аборты и нарушения нормальной вагинальной микрофлоры. Знание о том, когда и каким образом обращаться к врачу для сдачи анализа на ВПЧ, способствует поддержанию женского здоровья и позволяет вовремя принимать меры для предотвращения серьезных осложнений.
Подготовка и проведение анализа на ВПЧ у женщин
На анализ на ВПЧ могут направить уролог, дерматолог, венеролог или гинеколог в следующих ситуациях:
- при обнаружении симптомов папилломавирусной инфекции, появления бородавок на любом участке тела;
- в процессе планирования семьи или беременности;
- при участии в программе ЭКО;
- при бесплодии;
- при частых выкидышах;
- при активной сексуальной жизни;
- при меноррагиях и кровотечениях в климакс;
- при интимной близости без использования барьерной контрацепции;
- при кровоточивости из половых органов после полового акта;
- при истории ракового заболевания шейки матки;
- для мониторинга и оценки результатов противовирусной терапии.
Папилломы могут проявляться на коже (в любых участках), слизистых оболочках, включая ротовую полость, конъюнктиву, половые органы (в данном случае образования именуются кондиломами). С целью профилактики любой желающий, заботящийся о своем здоровье и здоровье своей семьи, может сдать анализ на ДНК ВПЧ.
Методы диагностики ВПЧ
Для выявления ВПЧ, определения его типа и оценки риска атипичного перерождения применяются следующие методы исследования:
- Иммуноферментный анализ (ИФА) — позволяет на раннем этапе диагностировать болезнь до проявления характерных симптомов. При попадании вируса в организм иммунная система вырабатывает специфические антитела (иммуноглобулины), которые фиксируются в ходе анализа.
- ПЦР применяется для обнаружения самого ВПЧ, как одного из немногих микроорганизмов, имеющих свою ДНК, что позволяет не только подтвердить факт инфицирования, но и определить тип и количество вируса.
- Digene-тест представляет собой амплификационный анализ, который помимо количественных показателей также позволяет оценить онкогенность патогена. Для тестирования берется соскоб со слизистой.
- Цитологическое исследование — позволяет под микроскопом выявить клетки, измененные под воздействием вируса. Классификация: 1-2 класс — не опасен, 3 класс — сомнительный, 4-5 класс — высока вероятность онкологического процесса.
- Гистологическое исследование необходимо для подтверждения или исключения наличия раковой опухоли, если при цитологическом обследовании выявлены клетки 3-5 классов.
У женщин кондиломы на шейке матки можно обнаружить при кольпоскопии. Кольпоскоп позволяет увеличить изображение, что значительно облегчает обнаружение даже самых мелких кондилом и атипичных изменений эпителия.
Раннее выявление папилломавируса трудно переоценить. Онкогенные кондиломы у женщин могут привести к раку половых органов, в то время как для мужчин ВПЧ также представляет определенную опасность. При локализации кондилом в уретре существует риск полной блокады мочеиспускательного канала, что может существенно нарушить процесс мочеиспускания. Папилломавирус также способен привести к импотенции и мужскому бесплодию.
Врач репродуктолог, акушер-гинеколог.
Цели исследования на комплекс ВПЧ
ПЦР диагностика комплексного ВПЧ (21 генотипа) является наиболее современным методом скрининга для выявления лиц, находящихся в группе риска по развитию рака шейки матки и предраковых состояний. Некоторые типы вируса паразитируют исключительно в эпителиальных клетках женской репродуктивной системы (слизистая уретры, шейки матки, сводов влагалища). Способы передачи инфекции — контактный, во время полового акта, что приводит к попаданию вируса на слизистую здоровой женщины от инфицированного партнера и его внедрению в клетки.
Оказавшись в эпителиальной клетке, ВПЧ использует ее как среду для жизни, применяя генетический материал в качестве матрицы для синтеза ДНК новых вирусов. В этом процессе возникают мутации, которые нарушают нормальный рост и развитие эпителия. В результате структура клеток и всей области слизистой оболочки претерпевает изменения (локальное утолщение, образование очагов разрастаний, метаплазия и трансформация в рак). Большинство подобных патологий заканчивается раком шейки матки.
Комплексное ПЦР-исследование на ВПЧ
Комплексное исследование методом ПЦР на вирус папилломы человека (ВПЧ) охватывает 21 виротип патогенов. В зависимости от их онкогенного потенциала, они делятся на три категории:
- Высокоонкогенные: 16, 18, 33, 35, 39, 45, 52, 59, 68, 73 и 82;
- С умеренной онкогенностью: 26, 53 и 66;
- С низкой онкогенной активностью: 6, 11, 40, 44, 54, 61, 72, 81.
Следует помнить, что ПЦР-скрининг на ВПЧ обязательно проводится для молодых женщин, имеющих активную половую жизнь, и у которых наблюдаются любые изменения в эпителии шейки матки или предраковые процессы в этой области!
Процесс проведения ВПЧ-комплекса (HPV-complex)
ПЦР-исследование начинается с забора необходимого биоматериала. В данном случае используется соскоб с поверхности слизистых оболочек, где находится папилломавирус: уретра и шейка матки. Объем исследуемых тканей должен быть достаточным. Крайне важно правильно провести забор материала и его дальнейшую транспортировку.
К основным правилам относится необходимость удалить всю шеечную слизь перед тем, как провести соскоб, и поместить образцы в специальные контейнеры с питательной средой сразу после забора. Затем материалы направляются в лабораторию для тестирования с использованием ПЦР на амплификаторе с флуоресцентной системой.
При анализе результатов ПЦР-соскобов на ВПЧ-комплекс (21 виротип) первым делом нужно оценить количество эпителиальных клеток в соскобе. Если их меньше 10^4 копий на образец, то тест проводить нельзя, и требуется более тщательный повторный соскоб. Большее количество клеток свидетельствует о достоверности результата.
Если ПЦР-анализа была выполнена с соблюдением всех стандартов, итоговые результаты могут быть представлены в следующих формах:
- Положительный – обнаружение ДНК определённых типов ВПЧ. Это указывает на то, что эпителий инфицирован соответствующим папилломавирусом, что потенциально увеличивает риск развития рака шейки матки;
- Отрицательный – отсутствие ДНК ВПЧ. Это говорит о том, что вирусная ДНК не обнаружена, и женщина не является носителем вируса, что минимизирует риски рака.
Применение количественного метода ПЦР на этапе исследования может быть обоснованно при обнаружении определённых типов ВПЧ в качественном тесте и необходимости мониторинга во время лечения данной инфекции. В отчёте указывается количество выявленных вирусных ДНК в соскобе, которое следует сравнивать с предыдущими значениями. Снижение этого показателя свидетельствует о положительной динамике лечения, тогда как его увеличение указывает на необходимость более радикальных вмешательств на шейке матки из-за прогрессирования инфекции.
